实验动物麻醉的效果直接影响着实验的成败。数据的准确性,选用不同的麻醉药物,配制不同的剂量,采用不同的方法都会产生不同的麻醉效果。
1.以下为北京大学第一医院动物实验室麻醉方法:
(1)氯胺酮:肌肉注射15mg/kg。注射后显效时间(2.96±0.97)分钟,(5.75±3.98)分钟动物进入麻醉状态,麻醉持续时间为(87.67±22)分钟。
(2)戊巴比妥钠:剂量30~40mg/kg,腹腔注射或者静脉注射。
(3)阿托品:剂量0.5mg,肌肉注射,以减少气道和口腔分泌物。
在麻醉过程中,猪的个体有差异,与药物的规格质量有效成分关系很大,故在麻醉过程中,可以剂量由低到高,也可在选用其他的麻醉药物。
大多数小型猪麻醉需要气管插管呼吸机辅助支持以确保实验动物的安全。但如果准确掌握手术时间,如在15分钟左右完成动物模型的建立,则可适当减少麻醉药物的用量,从而避免气管插管以及呼吸机辅助通气,以进一步减少手术时间和人力物力的消耗。但应注意在手术过程中应全程保证实验动物气道的通畅,随时注意呼吸的节律以及动脉血的颜色,一旦发现窒息或呼吸节律紊乱等,应及时应用尼克刹米以及呼吸机辅助通气。
2.应用气管插管呼吸机辅助下的麻醉方法(图5-4) 先肌肉注射氯胺酮6mg/kg+地西泮0.2mg/kg,基础麻醉(由于个体差异比较大,在此基础上,可以再追加氯胺酮),同时肌肉注射丁溴东莨菪碱0.3mg,以减少其口腔和气道分泌物。由于个体差异比较大,在此基础上,可以再追加氯胺酮。然后抬到手术台固定,耳缘静脉穿刺放置静脉套管(18~20G)。采用地西泮0.2mg/kg+芬太尼10μg/kg+氯胺酮2mg/kg+氯琥珀胆碱2~3mg/kg静脉诱导,气管插管采用特制长直喉镜,如果体重低于20kg,普通大号直喉镜也可以。如果最先对自己的插管技术没底,应该保留自主呼吸,并随时准备气管切开。
插管完成后接呼吸机,呼吸频率20次/分,潮气量10ml/kg(建议根据血气分析适当调整)。解剖猪颈内动、静脉,放置动、静脉导管,进行动脉测压,CVP测压补液。麻醉维持可采用静脉泵持续输注安定+氯琥珀胆碱,间断给予芬太尼+氯胺酮,具体用量、速度根据猪的生命体征调整。参照人体用药剂量,其他静脉麻醉药和肌松药如维库溴铵也可选用。如果采用的是麻醉呼吸机,也可以采用异氟醚吸入维持。